" cellules souches " hépatiques (hépatocytes fœtaux et embryonnaires)
Anne Weber
Directeur de Recherche
Préambule :
Mon équipe ne travaille pas sur les cellules ES ni sur les
cellules souches adultes, qui dans le foie - si elles existent -sont considérées
comme " en réserve " et qui ne peuvent pas être mises en évidence
dans un foie normal, mais sur les hépatocytes fœtaux et embryonnaires, sachant
que dans ces derniers aux stades précoces de développement existent les hépatoblastes,
cellules souches bipotentes précurseurs des hépatocytes et des cellules
biliaires.
1. Type de modèle cellulaire utilisé et espèce (humaine et/ou animale)
Hépatocytes fœtaux et embryonnaires de primate et humain
2. Quels potentiels de différenciation
peut-on obtenir : comparaison cellules souches adultes vs. cellules souches
embryonnaires dans votre modèle d'étude ?
cf. préambule : la cellule souche hépatique fait l'objet
d'un long débat qui dure depuis 1958.
Les 4 grands laboratoires américains qui travaillent sur le
sujet sont maintenant d'accord (opinion que je partage) pour dire qu'elle existe
et est stimulée à proliférer dans les conditions de stress toxique du foie
chez le rat (CCl4, galactosamine) et après administration de certains carcinogènes
chimiques (mais pas tous). J'ai démontré la présence de ces " putatives
" cellules (dites cellules ovales) dans un modèle de souris transgénique
pour T de SV40 sous contrôle d'un promoteur hépato-spécifique et développant
spécifiquement des hépatocarcinomes.
Ces cellules expriment effectivement des marqueurs biliaires
et hépatocytaires.
Chez l'homme elles sont recherchées dans les cirrhoses en
phase terminale par marquage immuno-histochimique mais non formellement prouvées
et encore moins isolées .
Nous avons immortalisé des hépatocytes simiens fœtaux qui
expriment des cytokératinocytes biliaires et hépatocytaires et semblent se
comporter comme des hépatocytes après transplantation dans des souris nude. La
même approche est en cours avec des hépatocytes embryonnaires humains.
D'après le modèle des cellules ES de souris, la différenciation
vers des types hépatiques n'a, à ma connaissance, jamais été obtenue (mais
je peux me tromper).
3. Capacité de mise en culture des cellules souches adultes
vs. cellules souches embryonnaires.
Nulle car les seules cellules " ovales " isolées
le sont à partir de foies transformés
4. Besoins nutritionnels en cultures in vitro
(type de milieu, facteurs de croissance, etc).
Les hépatocytes fœtaux et embryonnaires prolifèrent
spontanément pendant quelques divisions mais nous sommes en train de tester
plusieurs facteurs ;
5. Quelles propriétés (morphologiques, cytologiques
et/ou moléculaires) s'attachent à l'état de division et de différenciation
des cellules de votre modèle d'étude ?
Au cours de la différenciation des hépatocytes il existe
une séquence d'activation de facteurs de transcription (HNF4, 3 . ) mise en évidence
chez la souris et le rat, que nous souhaitons caractériser chez l'homme. Il en
est de même des protéines impliquées dans la polarisation qui est un gage de
fonctionnalité de ces cellules.
6. Destin de ces cellules lors d'un transfert in vivo
chez l'embryon ou chez l'adulte ?
Les hépatocytes embryonnaires sont en cours de réimplantation
chez la souris adulte ; au stade où nous savons les isoler actuellement (8-15
semaines) ils donneront naissance à des hépatocytes.
7. Degré de plasticité (trans-différenciation ) ?
Il vient d'être démontré que les cellules souches hématopoïétiques
pouvaient, dans certaines conditions, participer à la reconstitution du foie
chez la souris et le rat.
8. Voies d'accès au tissu-cible
chez qui l'on vise à produire un effet régénérateur ?
Injection via la veine porte ou directement dans le
parenchyme hépatique chez le singe fœtal ou nouveau-né.
9. Utilité des cellules souches
mises en œuvre dans votre modèle en thérapie cellulaire et en thérapie génique
: comparaison cellules adultes vs. cellules embryonnaires - Type(s) de
pathologie(s) humaine(s) susceptibles d'en bénéficier ?
Correction de maladies métaboliques hépatiques en thérapie
génique et cellulaire.
Les cellules adultes, par exemple provenant de la moelle,
semblent une approche prometteuse.
10. Clonage thérapeutique (potentiel ou effectif).